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                  諾如病毒分子檢測方案

                  發布時間:2017-03-23 點擊量:1204

                  諾如病毒是什么?

                  諾如病毒是一組形態相似、抗原性略有不同的病毒顆粒,諾如病毒感染性腹瀉在*范圍內均有流行,全年均可發生感染,寒冷季節呈現高發,學齡兒童是成為備受諾如病毒“寵幸”的對象。

                  需要注意的是,諾如病毒至今仍沒有疫苗和藥物!

                   

                  諾如病毒的傳播途徑

                  1.可通過污染的食物、水源、物品、空氣等傳播。
                  2.食源性傳播是通過食用被諾如病毒污染的食物進行傳播,牡蠣等貝類海產品和生食的蔬果類是引起諾如暴發的常見食品。
                  3.經水傳播可由桶裝水、市政供水、井水等飲用水源被污染所致。

                  我國對諾如病毒的監測工作

                  1.我國衛生部門于2005年啟動了病毒性腹瀉監測工作,在部分省市開展了生食動物性水產品中諾如病毒的常規監測,以進一步了解我國病毒性腹瀉流行病學規律、流行毒株特征,為制定有效的預防控制措施提供科學依據。
                  2.食品藥品監管總局2014年和2015年都將諾如病毒作為檢驗項目納入食品安全抽檢計劃,進一步加強監管工作。

                   

                  諾如病毒的檢測方法

                  1.電鏡法 
                  包括直接電鏡法(EM)和免疫電鏡法(IEM)。
                  設備昂貴;靈敏度與特異性相對較低;對操作人員的專業性要求較高;
                  2.免疫法 
                  包括放射免疫法(RIA)、生物素-親和素免疫法(Biotin-Avidin Immunoassy)和酶聯免疫法(ELISA) 。
                  RIA的靈敏度要比IEM高10-100倍,但需要使用放射元素進行標記,且需要時間較長(6d);Biotin-Avidin Immunoassy是美國疾病預防控制中心基于RIA建立的簡化方法,靈敏度與RIA相近;ELISA具有靈敏度高、耗時少、經濟的優點,便于廣泛推廣,但株型特異性太強,應用范圍較狹窄。
                  3.分子生物學檢測方法
                  包括等溫核酸擴增(NASBA)、逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)、熒光染料RT-PCR、熒光探針RT-PCR、多重RT-PCR等,是目前檢測諾如病毒應用比較廣泛的方法,被稱為檢測諾如病毒的“金標準”。

                  GB 4789.42-2016《食品安全標準食品微生物學檢驗 諾如病毒檢驗》中規定了食品中諾如病毒(Norovirus)的實時熒光RT-PCR檢測方法。

                  實時熒光RT-PCR檢測法的優勢

                  熒光探針RT-PCR通過特異性的熒光探針與引物,可實時監控反應過程中特異性產物的變化,并且可以實現同一管中多個基因的檢測(多重),特異性較好,假陽性率低,檢測靈敏度可達10-100拷貝/反應。

                  旋達R1諾如病毒核酸檢測試劑

                  PCR-熒光探針法參照GB 4789.42-2016開發
                  產品家族
                  012111M/L   諾如病毒GⅠ核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)
                  012121M/L   諾如病毒GⅡ核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)
                  012112M/L   諾如病毒GⅠ核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
                  012122M/L   諾如病毒GⅡ核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
                  012132M/L   諾如病毒GI型、GII型核酸檢測試劑盒(雙色熒光探針法)

                   

                  產品特點
                  操作簡單、快速判讀
                  特異性強、靈敏度高

                  適用儀器
                  恒溫熒光法適用:ZYD-S1、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308c等恒溫熒光檢測儀, ABI 7500,LightCycler480,CFX 96等熒光PCR儀。
                  PCR-熒光探針法適用:ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列、博日系列以及其它熒光定量PCR 檢測儀(可同時檢測FAM通道(494 nm)、VIC通道(538nm)、NED通道(546nm)三種通道的熒光定量PCR儀)。

                  產品性能指標
                  陽性參考品符合率:企業陽性參考品檢測結果應全部為陽性,陽性率為10/10;
                  陰性參考品符合率:企業陰性參考品檢測結果應全部為陰性,陰性率為10/10;

                  產品應用
                  國家、地方食品藥品監督管理單位對抽樣食品中潛在的諾如病毒污染進行快速檢測
                  出入境檢驗檢疫部門對進出口食品中諾如病毒的潛在污染情況進行快速檢測與篩查
                  食品生產加工企業對產品中潛在諾如病毒的污染情況進行快速檢測與篩查
                  重大活動中的食品安全保障
                  食品安全突發事件的快速檢測等

                   

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